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原位干細胞培植皮膚再生技術及大面積深度燒傷的系統(tǒng)治療

健康報 第四版 2001年6月19日
 

皮膚再生的微觀變化

皮膚再生后的微觀變化也與傳統(tǒng)療法的結(jié)果有本質(zhì)的不同。以深II度為例,幾乎所有教科書上都講,深II度燒傷一定是瘢痕愈合。我們的燒傷科技分中心的研究結(jié)果證明了MEBT/MEBO治療的深II度創(chuàng)面的微觀變化特點。為了科學的表達這一結(jié)果,我們用組織切片方法,跟蹤深II度創(chuàng)面愈合的全過程。從組織病理切片的光鏡和電鏡觀察中發(fā)現(xiàn)了許多奇觀。組織細胞的損傷特點是皮膚結(jié)構(gòu)破壞,真皮層出現(xiàn)空泡壞死,發(fā)生瘀血改變。電鏡下的表現(xiàn)也說明了這一點,如真皮層細胞發(fā)生壞死、血流瘀滯、真皮血管發(fā)生栓塞等,是典型的深II度燒傷特點。然而,經(jīng)過MEBT/MEBO治療3天后,壞死的固體組織變成了液體組織,即標志液化排除過程開始。治療5天,大范圍液化開始了,由表入里層層液化。但此時這些組織仍處在壞死階段。治療10天,液化基本結(jié)束,同時修復開始,界限相當清楚。一切組織都在膜下生長,這就是再生過程開始。由于再生細胞的形成并不是同時完成的,所以細胞及細胞內(nèi)部變化并不均勻,只是一個細胞群。而細胞群并不是一天形成的;干細胞群出現(xiàn),直至最后形成皮膚。這個現(xiàn)象我們早在1988和1989年發(fā)現(xiàn)了。當時將這種增生活躍細胞稱之為再生細胞,其實就是干細胞。因此說干細胞是本來就存在的,它就是一堆增殖分裂、分化能力比較活躍的細胞。干細胞的演變過程是從少到多,即形成一個胚胎樣結(jié)構(gòu),再轉(zhuǎn)為從多到少,皮膚創(chuàng)面愈合后則消失。

成纖維細胞合成活躍,它能為干細胞提供良好的物質(zhì)。成纖維細胞能生成膠原纖維,只要維持它的持續(xù)功能,就能不斷地為干細胞提供細胞外間質(zhì)重要成分之一膠原蛋白。因為深II度燒傷脂肪組織健存,用MEBO處理的創(chuàng)面成纖維細胞內(nèi)的纖維束相當整齊,電鏡下觀察如同頭發(fā)絲一樣。但是用磺胺嘧啶銀治療的創(chuàng)面,則不會出現(xiàn)上述結(jié)果,一定是瘢痕愈合。我們正在研究纖維干細胞修復。纖維干細胞能產(chǎn)生許多生長因子,調(diào)控組織修復。如纖維細胞數(shù)量增加,生長因子也增多,便抑制上皮生長因子,使生長因子比例失調(diào)。反之亦然。因此,它們之間必須保持一定的平衡,這就是再生修復的規(guī)律。成熟組織細胞一旦形成,就失去干細胞特性。這個深II度創(chuàng)面最終在22天愈合,完成了皮膚真皮和表皮完美的生理性再生,這才是真正的深II度創(chuàng)面愈合的組織表現(xiàn)特點。


干細胞的追蹤表達研究

干細胞的追蹤表達研究的目的是確認干細胞的存在。根據(jù)細胞周期的變化規(guī)律,有些細胞可長期處在G0期或G1期,只有在一定條件下才出現(xiàn)增殖活動;但有些細胞可持續(xù)進行分裂活動。分裂后的部分子細胞可分化為執(zhí)行一定功能的成熟細胞;另外一些子細胞則保持連續(xù)分裂、增殖的能力,此即為干細胞。正常皮膚表皮基底層干細胞可不斷地進行分裂,新生的細胞向上方移動,在到達棘層深部時,可再分裂2~3次,而后失去分裂能力。由此可見,皮膚淺II度燒傷干細胞是顯而易見、容易確認的。但是在III度燒傷創(chuàng)面上,表皮干細胞已破壞殆盡。但是,由于III度創(chuàng)面深層存在有脂肪及纖維隔組織,它可以提供干細胞來源,或者說干細胞是在創(chuàng)面局部附近存在的。我們采用免疫細胞化學方法在燒傷創(chuàng)面上尋找和印證干細胞。因為再生的表皮干細胞能合成特有的19型角蛋白,用抗人角蛋白19型單克隆抗體,用生物素-抗生物素蛋白DCS體系間接免疫熒光技術,能夠準確、特異地測定出深II度和淺III度燒傷皮膚殘存皮下組織再生的表皮干細胞。但應指出,當標本取下后不能使細胞發(fā)生傳代改變,如果細胞發(fā)生傳代改變,那就不是干細胞了,而變成了其它細胞。所以,我曾在1997年的學術報告中強調(diào),一定要設計原位,如果一旦發(fā)生傳代,就不能再表達創(chuàng)面的真實病理變化。角蛋白19型單克隆抗體免疫熒光試驗呈陽性反應細胞在燒傷創(chuàng)面上數(shù)量較多出現(xiàn),而正常皮膚可見少量陽性反應細胞。同時發(fā)現(xiàn),細胞的再生啟動是在兩小時后,而不是以往所說的3天后才開始發(fā)生再生反應。因為兩小時后滲出已開始,細胞可從中獲得生物素,并開始分裂。第4天,幾乎所有濕性療法創(chuàng)面組織里都有干細胞,而且是原始的干細胞。第7天干細胞仍然很多,說明液化和細胞生長的高峰期已經(jīng)開始;14天達最高峰。III度燒傷在27~28天的時候,真皮層幾乎已修復完整,但表皮尚未愈合。當皮膚一旦修復,角蛋白19型陽性細胞的數(shù)量又恢復到正常皮膚的水平了。這就是前邊所述的,干細胞的生長規(guī)律是一個從少到多,再從多到少的過程。由于MEBT/MEBO的治療作用,激活了休眠狀態(tài)的潛在干細胞的再生,從而有力的保證了深II度和淺III度燒傷能實現(xiàn)無瘢痕愈合和自然修復。

我們的研究還發(fā)現(xiàn),骨組織里面能長皮下組織和皮膚組織,將燒傷骨的表面進行鉆孔,當肉芽形成時會有表皮細胞生長,并能實現(xiàn)愈合。因為骨髓中有造血干細胞,而且是多功能干細胞。


大面積深度燒傷的系統(tǒng)治療

燒傷是一種全身性疾病,尤其是大面積燒傷。燒傷治療,不能僅從創(chuàng)面局部考慮,要從整體論上去考慮疾病的治療問題, 即局部與全身治療不能分割。在MEBT/MEBO作用下,可以實現(xiàn)創(chuàng)面生理性愈合,如何實現(xiàn),系統(tǒng)治療就是保障。沒有這個保障,不可能取得良好的治療效果。之所有強調(diào)系統(tǒng)治療,還因為我們的局部治療方法改變了,即不是過去西方傳統(tǒng)的外科治療模式,而是燒傷濕性醫(yī)療技術,它不是以外科手術為主的治療方法。鑒于這種情況,必須對全身系統(tǒng)治療加以調(diào)整,進行統(tǒng)一,或者說要有一個治療方案。但是,這個方案并非是適應于所有病人的,因為病人之間差異很大,我們主張治療方案個體化,或者說這個方案是建議性的。但是,在整個治療過程中所采取的一切治療措施都要圍繞一個原則,即是不增加第二次創(chuàng)傷和不造成第二次打擊的治療方案,維護生命的整體規(guī)律。不僅是局部,對全身也是如此,如不增加心、腎、腦負擔,保護肝臟功能等。

(一)早期救治問題

這是燒傷治療的第一關。根據(jù)上述原則,不給病人造成二次創(chuàng)傷打擊,除不對創(chuàng)面的打擊外,還包括對精神因素的保護。精神因素分主、客觀兩方面。燒傷后病人恐懼感加重,腦垂體要分泌、釋放許多激素類物質(zhì),可能在短時間內(nèi)全部釋放出來,這是病人的自我保護性反應。但在燒傷那一霎那痛覺產(chǎn)生,燒傷疼痛與創(chuàng)面直接暴露于空氣中有關,這個發(fā)病過程影響燒傷全病程。當情緒穩(wěn)定后,大面積燒傷病人抵抗力低下,這是個規(guī)律。面對這一規(guī)律,首要的是穩(wěn)定病人情緒。此后進入第二階段,病人從一個情緒最激昂狀態(tài)一下落到最低狀態(tài),但早期應激狀態(tài)下的代謝產(chǎn)物,要在此階段產(chǎn)生病理生理反應。所以說燒傷病人的全身功能狀態(tài)一旦脫離現(xiàn)場,即進入低潮階段,而且逐步降低。傷后兩小時之內(nèi)的變化為內(nèi)分泌性的、打擊性的;2小時之后的改變與血容量下降有關,心肌缺血,體液重新分配。因此要加強心、腎等臟器的保護,注意病人采取合適的體位,宜取平臥位,但不取頭低位,也不宜搬動病人。其次,早期救助要注意保溫。因為病人體溫調(diào)節(jié)功能低下,水分蒸發(fā)量增加,熱量大量喪失,自我保溫功能降低。往往病人感覺越冷、體溫則越高;感覺不冷身體也不發(fā)熱。因此,早期救助要通過外界環(huán)境予以補充。再次是創(chuàng)面處理,如果現(xiàn)場無法處理可不予處理,但能處理者一定不要給予二次打擊,可用MEBO保護創(chuàng)面,或簡單包扎起來后送醫(yī)院實行MEBI/MEBT治療。

(二)治療問題

病人入院后不進行徹底清創(chuàng)處理,而用美寶(MEBO)清創(chuàng)術,即不是用水沖洗,而是以藥刀相結(jié)合而達到創(chuàng)面清潔的方法。這種清創(chuàng)術可在病房內(nèi)進行。美寶可止痛,可以去除余熱,利于已壞死組織液化等。

在強心、保腎措施的同時,要注意觀察尿量,因為它對補液措施的制定有重要參考價值。
關于休克期補液量問題,因為我們采用的是濕性醫(yī)療技術,在局部處理方法上與西方傳統(tǒng)醫(yī)學截然不同,因此不能機械地執(zhí)行他們的補液公式。根據(jù)我們10多年的臨床實踐得出的經(jīng)驗公式為:

每日液體入量(ml) =
每日生理需水量(2000~2500 ml)+ % TBSA燒傷面積×1.0(ml)×kg體重
ml每小時尿量 / kg(體重)

以上公式適用于傷后48 ( 72小時之內(nèi),主要調(diào)整指標是尿量。只要保證每小時每公斤體重尿量不少于1ml,不論成人還是小兒,此公式皆宜。當然,每個醫(yī)院都有自己的治療經(jīng)驗,此公式僅是一個經(jīng)驗公式,應根據(jù)病人的具體情況確定輸入液體的種類及總量,同時應對休克原因進行分析,據(jù)情做相應處理。
除抗休克之外,另一個重要問題是抗感染治療。抗感染治療的原則是根據(jù)燒傷后細菌的變化規(guī)律而制定的。因為燒傷后早期(7天內(nèi)),全身因創(chuàng)傷應激反應處于亢進狀態(tài)。在這7天內(nèi),應當說全身幾乎動用了所有的力量來對付嚴重的應激狀態(tài)。這7天的變化可歸納為三波:創(chuàng)傷波、休克波、代謝波。由于三波的存在,這7天內(nèi)機體的變化是反復無常的,體內(nèi)沒有更多的能量及抗病能力,表現(xiàn)最突出的一點就是免疫功能下降。此時要用高效、廣譜、足量抗菌藥物,其目的之一是預防性應用,輔助機體度過難關?咕幬镫m有一定副作用,但此時應用常不明顯。7天后,機體合成代謝加強,主要表現(xiàn)在臟器功能和創(chuàng)面愈合方面。如肝臟,由于肝細胞修復能力很強,經(jīng)過早期作用之后,肝細胞功能很快恢復,蛋白合成速度增加,抗感染能力加強。在創(chuàng)面修復方面,干細胞的代謝需要蛋白質(zhì),要分裂、增殖,若再使用大量高效廣譜抗菌藥物,會抑制細胞合成。故從全局角度考慮,5(7天后建議停用抗菌藥物。當然,7天后可能還會發(fā)生感染,但感染原因來自腸道的可能性很小,多數(shù)情況為創(chuàng)面感染,因為此時腸粘膜功能已基本恢復。所以我們應經(jīng)常檢查創(chuàng)面是否存在病灶,一旦發(fā)現(xiàn)感染灶,立即清除。一般認為,休克過程中存在有腸源性感染的傾向,因為腸粘膜總有損害,故有感染的危險。但休克期發(fā)生的感染不易辨認。對全身性感染的識別,主要通過觀察呼吸、心跳、體溫的變化,把這三方面的癥狀結(jié)合起來分析,簡稱為三聯(lián)征,而且需要一個一個的識別,一個一個的排除。細菌學檢查很有必要,但往往來不及進行,此時要看周圍血象中白細胞的中毒顆粒。因為它與菌血癥、毒血癥有關。菌血癥時常出現(xiàn)吞噬細胞變化,而不出現(xiàn)中毒顆粒;毒血癥中毒顆粒明顯增加,此時可采用一次性大劑量抗生素處理,并應尋找感染源。關于抗感染治療,我們?nèi)詮娬{(diào)并非把細菌殺死才是抗感染,MEBO本身具有改變細菌形態(tài)和降低細菌毒力的能力,這對抗感染來說應視為與抗生素同等重要。

營養(yǎng)支持療法也是全身系統(tǒng)治療的一個重要組成部分,以腸道營養(yǎng)為主是我們多年的治療經(jīng)驗,但何時實行口服營養(yǎng),或是接受靜脈營養(yǎng)治療,應視病情而定。

今年是衛(wèi)生部十年百項醫(yī)藥衛(wèi)生技術推廣普及的最后一年,在衛(wèi)生部的大力支持和我們的努力下,這一創(chuàng)新技術已成為國內(nèi)燒傷治療的常規(guī)技術,并已主導本世紀世界燒傷及創(chuàng)面愈合的新潮流。

 

 

 
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