三、人類對干細胞的夢想已首先在東方實現(xiàn)

      1.僅用經(jīng)驗性的理論對燒傷濕性醫(yī)療技術作出解釋是不夠的。
      20世紀90年代初，徐榮祥完成的燒傷濕性醫(yī)療技術在燒傷臨床治療醫(yī)學領域掀起了一場風暴。他的醫(yī)療技術徹底地改變了燒傷治療醫(yī)學的現(xiàn)狀，通過使用他獨創(chuàng)的藥物MEBO和濕性療法，即使是重度燒傷，患者的創(chuàng)面也能實現(xiàn)無疤痕愈合。
      革命性的治療效果對傳統(tǒng)的以燒傷外科為基礎的燒傷技術產(chǎn)生了強烈的震撼。徐榮祥和他的醫(yī)療技術成為傳統(tǒng)燒傷醫(yī)學爭論的焦點。一些學者否定濕性醫(yī)療技術，指責徐榮祥是騙子，其所謂的醫(yī)療技術是騙術。而另一些學者則不僅把濕性醫(yī)療技術看成是燒傷醫(yī)學的最高成就，自己也成為濕性醫(yī)療技術積極的鼓吹者和實踐者。
      同樣都是傳統(tǒng)燒傷外科的學者，針對同樣一個技術，態(tài)度和立場截然相反，針鋒相對，這是為什么？
      反對者所以反對，支持者所以支持，實際上，都與一個核心問題相聯(lián)系，那就是基理。
      反對者在看待和評價濕性技術時，是從經(jīng)驗出發(fā)，以傳統(tǒng)的理論作為依據(jù)的。按照傳統(tǒng)的經(jīng)驗，受損傷的皮膚組織除表皮可以自行生理性愈合而不留疤痕外，深層皮膚是不可能自行生理性愈合不留疤痕的。傳統(tǒng)的理論為這一經(jīng)驗提供了解釋，表皮皮膚創(chuàng)傷可以愈合是因為表皮有基底干細胞存在，當表皮受損，基底干細胞會自然啟動，分化形成組織，并最終完成損傷皮膚的修復。即便皮膚未受損傷，正常的表皮組織代謝也需要產(chǎn)生新的組織以替代舊的組織，這一過程也是由基底干細胞自然完成的。基底干細胞主要位于表皮層，真皮層也有少量存在，因此，一旦燒傷深及表皮下的真皮、脂肪層或肌肉層，表皮的修復就不再可能，原因很簡單，那里沒有干細胞。根據(jù)這一既有的理論，一些學者自信地得出結論：隨便徐榮祥瞎吹，治好了這個，治好了那個，肯定是假的，不符合生命規(guī)律的事情，誰也辦不到！
      盡管經(jīng)歷了近十年的發(fā)展，利用濕性醫(yī)療技術救治成功的病人累計已近上百萬，這一實際存在的現(xiàn)實卻仍不足以改變持反對意見者的態(tài)度。不能怨人食古不化，也不能怨人冥頑不化，問題在于基礎理論方面。在分子醫(yī)學的時代，人們已經(jīng)能夠在分子水平上對一些影響生命的現(xiàn)象的規(guī)律作出更深刻更精確的描述，而濕性醫(yī)療技術仍僅僅通過在治療學方面總結出的一些經(jīng)驗性的理論來解釋燒傷濕性醫(yī)療技術，這顯然是不夠的。
      不過，在支持徐榮祥濕性醫(yī)療技術的學者那里，他們卻為濕性醫(yī)療技術受到的指責抱不平。從現(xiàn)實出發(fā)，在這些學者眼里，事實是第一位的，理論是第二位的。徐榮祥濕性醫(yī)療技術的貢獻絕不單純是將燒傷醫(yī)學提高到一個前所未有的水平，更重要的是他通過自己的醫(yī)學實踐揭示了一種現(xiàn)象，即深度損傷的皮膚也是可以實現(xiàn)生理性愈合的。這不僅是治療醫(yī)學的革命，更是人類認識的一場革命。如果沒有濕性醫(yī)療技術，人類對于有關皮膚組織生長的認識不要說在本質(zhì)上有多深刻，就是在現(xiàn)象上也是不全面的。
      對于濕性醫(yī)療技術，理論上講不清，并不是濕性醫(yī)療技術的錯，而恰恰是傳統(tǒng)的理論隨著新的現(xiàn)象的出現(xiàn)，已不能滿足現(xiàn)實的需要，現(xiàn)實要求它必須積極地正視現(xiàn)實，迎接挑戰(zhàn)，面臨更新。一些敏感的學者強烈地感到啟動濕性醫(yī)療技術基理方面的研究已迫在眉睫，勢在必行，同時他們也感悟到濕性醫(yī)療技術基理的研究對未來的影響，不會單純地局限在燒傷醫(yī)學的領域，它的效應可能會是一場核裂變，波及整個醫(yī)學，深及未來的生命科學。這或許也就是巴巴拉和高登兩位美國學者用諾貝爾獎作尺度來衡量其研究價值的真實原因！
      對于濕性醫(yī)療技術基理的研究，他的發(fā)明者徐榮祥更是孜孜以求。在濕性醫(yī)療技術誕生后，徐榮祥在進一步完善技術的同時，便開始了燒傷濕性醫(yī)療技術所實現(xiàn)的損傷皮膚無疤痕愈合基理方面的研究，其探索的努力也從未停止過。早在1989年，在徐榮祥創(chuàng)辦的《中國燒傷創(chuàng)瘍》雜志的創(chuàng)刊號中，他和他的研究者就刊登文章研究在光學顯微鏡下觀察到的皮膚細胞表現(xiàn)特殊的生長情況。大規(guī)模地開展研究則是從1991年的最后一個季度開始的。
      2.干細胞大兵團遠征計劃中途夭折
      1991年10月25日，美國新澤西海肯塞醫(yī)療中心著名燒傷醫(yī)學專家巴巴拉打來國際長途，興奮地向徐榮祥通報了他對燒傷濕性治療技術的核心藥物BC4D 進行重復實驗研究的情況。以下是當時電話記錄的摘要：
      1990年12月你來美訪問，臨走時，交給我的關于MEBO研究，經(jīng)過一年的實驗，終于有了結果，你留下的MEBO共進行了如下實驗，結果很令人滿意。
      第一個實驗是利用MEBO進行了體外細胞的培養(yǎng)研究。簡單說，實驗方法如下：用兩組試管，均裝有細胞培養(yǎng)液并放入上皮細胞，然后在其中一組中的試管液內(nèi)放入MEBO，而另一組不放入MEBO，進行對比細胞培養(yǎng)試驗。其實驗結果是非常令人吃驚的。發(fā)現(xiàn)在放入MEBO的試管中，其上皮細胞變?yōu)榛讓蛹毎?，且生長速度非?？?，其高速生長的基底層細胞在質(zhì)量上均是成熟的。這一切我們均利用較精密的儀器進行了測量。這樣的結果是在國際上的重大突破。在世界上，任何藥物均不能出現(xiàn)此結果！
      第二個實驗結果：將成塊真皮放入細胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)殘留在真皮內(nèi)的殘存毛囊腺上皮及毛囊腺在MEBO的作用下，再生速度非?？欤偕龅拿蚁?、毛囊器的形態(tài)與正常原有的相同。這一切變化均是通過顯微鏡而直接觀察到的。對這樣的變化，以前人們曾根據(jù)毛囊的再生規(guī)律預想過，但因毛囊上皮生長速度極為緩慢，從沒有人能描述，更不能直接觀察到毛囊再生的情況，而使用MEBO后，毛囊腺上皮再生速度明顯加快，人們可直接觀察到。這是一個重要的國際性突破。
      第三，關于分子生物學的研究結果：我們對使用MEBO后的組織細胞的再生基因工程進行了研究，通過實驗儀器對RNA、DNA合成了測量。實驗結果證明：使用MEBO后，其中的DNA、RNA的數(shù)量大量增加，說明細胞的分裂速度較快。這一結果和以上所報告的結果都是極為重要的，在世界上也從來沒有人做過此項試驗，也從來沒有獲得這樣的結果。
      這些結果對美國FDA通過MEBO進入美國市場也有著更重要的作用。這項實驗是在美國FDA認可的實驗室內(nèi)進行的，是完全可信的，更何況此項實驗是FAD撥款的。
      盡管巴巴拉描述的這些實驗中的一些實驗，徐榮祥已經(jīng)做過，但是從大洋彼岸傳來的信息還是使徐榮祥產(chǎn)生了一種競爭世界科學最前沿的緊迫感。放下電話，徐榮祥匆忙整理完材料，便直奔衛(wèi)生部科技司，向有關領導作了匯報，并提議由國家主持正式全面啟動濕性醫(yī)療技術有關基理的研究。徐榮祥的建議立即得到衛(wèi)生部科技司和部主要領導的高度重視。
      1991年10月30日，在衛(wèi)生部科技司召集和主持下，一個由中國醫(yī)學科學院、中國預防醫(yī)學科學院和北京醫(yī)科大學等權威醫(yī)學研究機構的基礎研究專家參加的大型學術報告會在首都賓館舉行。會上，徐榮祥向基礎醫(yī)學專家詳細地介紹了燒傷濕性醫(yī)療技術對燒傷皮膚組織實現(xiàn)生理性修復所起到的特殊功效，并提出了基礎研究所要研究的課題。這些課題包括：一、汗腺上皮再生表皮，二、真皮及附件完全再生，三、DNA高速變化規(guī)律。
      徐榮祥的報告激活了基礎醫(yī)學專家的神經(jīng)，僅僅一個月，近五十名著名的基礎醫(yī)學專家提交了落實研究的詳細課題設計，直接參加這項研究的科研人員多達150人。當厚厚的課題報告書堆滿了案頭的時候，徐榮祥仿佛進入了遠古的英雄時代，他像史詩中的英雄一樣真實而深切地感受到了一場世紀之戰(zhàn)的恢宏。
      多么雄渾激越的時代，多么催人奮進的計劃，多么激動人心的研究！
      正當圍繞揭示皮膚細胞生長規(guī)律而展開的大兵團作戰(zhàn)的英雄史詩的帷幕即將拉開的時候，徐榮祥突然受到了來自傳統(tǒng)燒傷醫(yī)學最猛烈的沖擊。
      盡管在衛(wèi)生部的關懷下，在國務院的支持下，徐榮祥躲過了劫難，沒有被狂風暴雨所襲倒，但是他剛剛組織起來的遠征軍卻被支解得七零八落。在以后的日子里，抨擊與反抨擊、調(diào)查與被調(diào)查、陷害與反陷害的角逐構成了徐榮祥人生中一段復雜而險越的經(jīng)歷。為了挺直燒傷濕性醫(yī)療技術稚嫩的身軀，他不得不卷入一場求生的斗爭，皮膚組織細胞學的研究計劃被迫暫時埋藏在了心靈的最深處。
      1994年底，徐榮祥的命運引起剛剛走馬上任的衛(wèi)生部新任副部長張文康的關注，他找到徐榮祥，關切地詢問了濕性醫(yī)療技術有關基理的研究情況。當?shù)弥鞓s祥的研究因?qū)W術紛爭而裹足不前時，張文康當即果斷地指示，研究工作不能中止，衛(wèi)生部將努力創(chuàng)造良好的環(huán)境，支持徐榮祥的研究。
      躲過了寒冬的徐榮祥，倍感春天的溫暖。1995年5月22日，通過中央電視臺的《新聞聯(lián)播》，徐榮祥向社會公布了啟動皮膚干細胞的研究計劃。
      3.鎖定合成人類角蛋白19型細胞
      沒有大規(guī)模的兵團，沒有聲勢浩大的儀式，僅僅帶領了一支不到十人的隊伍，徐榮祥神秘地從公眾媒體上銷聲匿跡。1996年4月1日，他帶領著自己的研究小組離開北京，驅(qū)車直奔有大量正在接受濕性醫(yī)療技術治療的重度燒傷病人的湖北襄樊，開始了他有關皮膚再生基理的細胞學臨床與基礎密切結合的研究。
      徐榮祥這一次開展研究同5年前組織大兵團時在思路發(fā)生了很大的變化。5 年來為求生存而展開的斗爭固然耽誤了許多寶貴的時間，但是時間也使徐榮祥的思想得到了一次沉淀的機會。從對細胞的狂熱到冷靜，時間濾去了一些浮躁的表皮的虛像，而使得隱秘的本質(zhì)的聯(lián)系漸漸地凸顯出思維的平臺。
      5年間，徐榮祥并未停止對皮膚組織再生基理的思考，最初這些思考呈現(xiàn)為一種靈感式的迸發(fā)狀態(tài)，思想的火花五彩繽紛，四處飛濺，豐富而零亂，仿佛急需開展的研究有很多很多，簡直是五花八門，樣樣齊全，專家申報了50多個課題仍讓他感到不夠過癮。而隨著時間的推移，漸漸地，他的思想開始完全集中到了干細胞這唯一的目標上。
      他的思想被一個在細胞學上稱為角蛋白19型的干細胞牢牢地控制著。最初，并沒有通過邏輯性演繹縝密清晰的步驟，僅僅是一個靈感，一種直覺使他關注到這種細胞。他及時地捕捉住它，生怕它會從裂變的思維中消失。后來，通過理性的分析，在沒有得到實驗證實之前，他就已作出了超前的判斷：完成深度損傷皮膚生理性修復的基礎物質(zhì)很可能就是人類角蛋白19型這種干細胞。這一判斷一經(jīng)作出，他的大腦就被完全鎖定了，幾乎到了想掙脫都沒辦法掙脫的地步。
      早在1989年，徐榮祥就通過光學顯微鏡直接觀察到燒傷的皮膚組織在接受MEBO這一藥物治療后細胞組織出現(xiàn)的特異性變化。這和巴巴拉在體外觀察的結果是相同的。在施用了MEBO之后，燒傷創(chuàng)面上增生了許多細胞，這些細胞聚集在一起形成了一個群狀的細胞團。這樣的變化在沒有用藥的創(chuàng)面上是根本見不到的。當徐榮祥把這樣的組織切片送到解放軍總醫(yī)院細胞室進行觀察的時候，權威的細胞學專家不禁驚嘆：“這是什么組織，燒傷的皮膚創(chuàng)面怎么會有胚胎組織類型的細胞！”
      根據(jù)已知的基礎研究提供的有關皮膚組織細胞的知識，徐榮祥知道已探明的皮膚分化程度不同的表皮細胞含有5種類型的角蛋白：合成人角蛋白1型、10型、9型、16型和19型。這些不同類型的細胞其功能表達各不相同。合成1型和10型角蛋白的細胞是生成較硬皮質(zhì)的細胞，它是成熟的表皮細胞，其分化增生的功能已接近完結；合成角蛋白9型和16型的細胞是表皮干細胞移行過程中的中間型細胞，是可以分化形成合成1型和10型角蛋白的細胞，屬于有分化能力的未成熟細胞；而含角蛋白19型的細胞則是提供表皮再生的，分化能力最強的表皮干細胞。
      完成人類皮膚的生長和修復，這些細胞在不同階段都起到了相應的作用，但是它們中除了19型是最原始的類型外，其余的1型、10型、9型和16型都是中間階段的類型，它們本身就存在于表皮層，在表皮以下的組織中是不存在的。因此要實現(xiàn)深度燒傷皮膚修復，這樣類型的細胞是力所難及的。唯一有可能的只有19型。
      不過，要讓思維確信無疑地接受19型，并不是順理成章的事，中間仍然有思想障礙需要排除。因為19型是胚胎細胞，也就是說根據(jù)已有的知識，它只有在人剛剛由受精卵在子宮中發(fā)育成胚胎時才可以見到，隨著胚胎進一步的發(fā)育，19型就會分化變成其他類型的細胞。如果要確定19型，那么，除非首先要在19型細胞可能出現(xiàn)的位置上實現(xiàn)突破，即在被認為是不可能出現(xiàn)的地方，如表皮層、真皮層、脂肪層，甚至肌肉層中尋找到19型的蹤影；其次，就是跟蹤19型的變化規(guī)律，如果在深度燒傷皮膚愈合的過程中，能夠確定地追蹤到19型細胞分裂、增生，并有轉化為其他更為成熟的諸如1型、10型、9型和16型等類型的跡象的話，確定19型才可以說是板上釘釘?shù)亩ㄕ摗?BR>      4.拿下干細胞有如探囊取物
      理論先行使實踐免走了很多的彎路，原來認為需要瞄準多個目標，進行大規(guī)模協(xié)同作戰(zhàn)的戰(zhàn)略，現(xiàn)在變得沒有必要?，F(xiàn)在的目標非常明確：就是要直截了當拿下合成人角蛋白19型細胞。原本要動用千軍萬馬的巨工程被簡化成僅僅只要一個科研小組就可以完成的工作。而這個科研小組所作的工作也被壓縮成兩個方面。一方面是嚴格監(jiān)督臨床治療的規(guī)范性，以便按照根據(jù)對照取樣需要設定的時間表，準確地從患者創(chuàng)面獲取到可供基礎研究觀察的病理切片。另一方面是選擇最優(yōu)秀的實驗室，用最先進的細胞追蹤技術，追蹤干細胞的變化規(guī)律。
      正巧這時湖北襄樊有一批重度燒傷病人，他們?yōu)殚_展干細胞的基礎實驗研究提供了得天獨厚的機會。徐榮祥親自參與搶救和治療每一個病人，并指導研究人員按設計規(guī)范做病理切片。同時，他還不得不時常趕回北京，與中國醫(yī)科大學的實驗人員共同探討實驗設計和方法。有一次，當他回到北京，剛下飛機打開手機，襄樊臨床基地的電話便追了過來。一位燒傷危重病人突然病危，臨床醫(yī)生處理不了。徐榮祥毫不遲疑，沒出機場，立即又登上了返程的航班。就在當?shù)蒯t(yī)生作出決定，準備對這位病人放棄治療時，他沖進了病房。經(jīng)過他簡單的處理，病人的危險癥狀立即得以緩解。 
      北京方面的研究情況也曾出現(xiàn)過周折。最初，實驗人員對切片進行免疫熒光觀察時，結果很不理想，在切片上，他們沒有發(fā)現(xiàn)有合成角蛋白19型的細胞。當這樣的結果呈送到辦公桌上的時候，徐榮祥感到很意外，他根本不相信會是這種結果，因為他對19型很有信心。
      無論從純理論的推斷，還是從實驗觀察所使用的技術方面都很難找出缺陷，徐榮祥開始對實驗的結果進行分析，這時他發(fā)現(xiàn)實驗結果反映出的情況有些離譜，切片反映出的細胞狀態(tài)是發(fā)生傳代變異了的，而不是原始的。這說明取切片的方法可能存在問題。
      回過頭來，重新檢討取切片的方法，徐榮祥發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生他推斷的那種可能性確實存在，于是他和驗證課題組的成員中國醫(yī)學科學院協(xié)和醫(yī)科大學的許增祿教授商議決定對切片進行即時冷凍并置于液氮中保存。保存切片的方法一改變，實驗觀察便迅即走上了一條通衢大道。
      接下來的工作就是對切片進行生物素抗生物素蛋白DCS體系間接免疫染色。生物素抗生物素蛋白DCS體系間接免疫染色是目前世界上最先進的細胞染色技術，它使目標能夠通過熒光顯示得到特異性的標識，因而是追蹤細胞變化的理想手段。
      首先，為了測定接受治療的燒傷皮膚組織中確實存在角蛋白19型細胞，研究者選用小鼠抗人角蛋白19型的單克隆抗體進行測試。實驗同時對正常皮膚與接受濕性醫(yī)療技術治療的燒傷皮膚進行對照測試，以觀察二者有無特異反應。實驗結果是理想的，研究者在正常皮膚組織中沒有發(fā)現(xiàn)有呈陽性反應的角蛋白19型細胞，而在接受MEBO藥物治療的燒傷皮膚組織中，24小時后，發(fā)現(xiàn)有顯示熒光呈陽性反應的角蛋白19型細胞。
      其次，繼續(xù)觀察接受治療的燒傷組織細胞的變化情況。研究者發(fā)現(xiàn)治療后4天，在汗腺、毛細血管和毛囊周圍潛在的角蛋白19型細胞開始增多。治療后7—14天，角蛋白19型細胞的數(shù)量接近并達到峰值。至21天和28天這個時間段，角蛋白19型細胞的數(shù)量開始回落。這個觀察結果與燒傷皮膚接受治療的臨床及組織學研究結果正相吻合。
      這項研究實現(xiàn)了研究者最初設定的目標，即確定角蛋白19型干細胞，追蹤其分化增生的規(guī)律。燒傷皮膚組織再生修復的基理終于顯出了端倪。
      第一，通過這項研究證實了在殘存的燒傷組織中可產(chǎn)生人角蛋白19型這種最原始的胚胎類型的細胞；人角蛋白19型細胞數(shù)量上的變化說明人角蛋白19型細胞具有不斷分化和持續(xù)增殖的功能。
      第二，從免疫熒光染色特異性表達的結果可以發(fā)現(xiàn)它在移動和分裂后，能產(chǎn)生合成其他類型角蛋白1型和10型的細胞，這些細胞繼續(xù)分裂產(chǎn)生合成成熟表皮細胞所含的典型的角蛋白1型和10型的細胞，這充分說明人角蛋白19型細胞就是承擔燒傷皮膚組織再生修復的細胞。
      第三，研究者還初步確定了人角蛋白19型細胞啟動調(diào)控的規(guī)律。研究表明，細胞是從靜止期釋放出來的，首先被激活的周期蛋白是cyclin D，在受到生長因子刺激后，它才表達，真核生物在細胞的G1期決定進入增生狀態(tài)還是退出周期，此時主要的調(diào)控者是周期蛋白cnclin D1/CDK4復合體，由此可以證實濕性醫(yī)療技術對干細胞分裂復制和再生具有啟動和調(diào)控的特殊作用。
      第四，研究中還尋找出了成纖維細胞、血管組織細胞及皮膚神經(jīng)細胞在皮膚再生過程中各自及相互間的持續(xù)增殖及形成皮膚的規(guī)律，其詳細成果研究者將陸續(xù)公布。
      1998年4月，徐榮祥領導的科研小組旨在確定損傷皮膚生理性愈合基理的干細胞研究已初步完成，人類試圖利用干細胞治療臨床疾病的宏圖首先在古老的東方美夢成真！