第十節(jié) 燒傷濕性醫(yī)療技術(shù)MEBO的抗菌作用實(shí)驗(yàn)研究（續(xù)）

[摘要] 目的：觀察MEBO（含100%MEBO，以下簡稱MEBO）對燒傷常見細(xì)菌變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌的作用。方法：將上述細(xì)菌接種在普通瓊脂培養(yǎng)基上，并在接種的細(xì)菌表面涂上一層MEBO，置37℃，20h～22h觀察。結(jié)果：MEBO使上述細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變異。與在含25%MEBO和含50%MEBO的培養(yǎng)基上細(xì)菌形態(tài)變異現(xiàn)象相比較，無論細(xì)菌形態(tài)變異出現(xiàn)的時間和形態(tài)變異的特點(diǎn)都有明顯差別。結(jié)論：MEBO具有較強(qiáng)的抗菌作用。

[關(guān)鍵詞] MEBO 細(xì)菌 形態(tài)變異 血漿凝固酶

已有實(shí)驗(yàn)報(bào)道觀察了變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌在含有25 %MEBO和50%MEBO培養(yǎng)基上形態(tài)結(jié)構(gòu)等特性的變異現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)是模擬臨床燒傷病人創(chuàng)面涂抹一定厚度MEBO的用藥方法而設(shè)計(jì)的。實(shí)驗(yàn)觀察了MEBO使上述細(xì)菌發(fā)生形態(tài)變異的現(xiàn)象，比在含25%MEBO和含50%MEBO培養(yǎng)基上的形態(tài)變異現(xiàn)象出現(xiàn)得早，形態(tài)變異特點(diǎn)也有差別，進(jìn)一步驗(yàn)證了MEBO的抗菌作用。

材 料 和 方 法

1. 材料

MEBO: 北京光明中醫(yī)燒傷創(chuàng)瘍研究所研制。菌種：大腸桿菌、變形桿菌和金黃色葡萄球菌（由本室提供）、綠膿桿菌（由濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院院檢驗(yàn)科提供）。營養(yǎng)瓊脂：北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠。

2. 實(shí)驗(yàn)方法

制備普通瓊脂培養(yǎng)基。將上述4種細(xì)菌分別密集劃線接種于普通瓊脂培養(yǎng)基上。接種細(xì)菌的面積約5cm×3cm。再將擠出的MEBO放于培養(yǎng)基中未接種細(xì)菌的部位，分別用無菌的取菌環(huán)取MEBO以密集劃線法涂布于已接種細(xì)菌的表面。然后，將培養(yǎng)基置37℃培養(yǎng)箱。20～22h為一代進(jìn)行傳代，傳10～15代。每代細(xì)菌都在涂抹MEBO的細(xì)菌處2～3個不同部位取菌涂片、染色，觀察形態(tài)變化。做金黃色葡萄球菌血漿凝固酶試驗(yàn)，觀察綠膿桿菌色素變化。

3. 檢測指標(biāo)

(1) 觀察MEBO對變形桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。

(2) 對上述4種細(xì)菌在MEBO和在含25%MEBO、50%MEBO培養(yǎng)基上細(xì)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、變異特點(diǎn)進(jìn)行比較。

結(jié) 果

1. MEBO對4種細(xì)菌形態(tài)變異的影響

(1) MEBO對變形桿菌形態(tài)變異的影響（見表5-10-1）

37℃，20～22h培養(yǎng)后進(jìn)行觀察比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明MEBO對上述4種細(xì)菌在導(dǎo)致形態(tài)變異，使綠膿桿菌色素消失，和使金黃色葡萄球菌血漿凝固酶產(chǎn)生能力減弱等方面都比25%MEBO和50%MEBO的作用顯著，而且出現(xiàn)早，形態(tài)變異的特點(diǎn)也有差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與以前報(bào)道的不同濃度的MEBO的抗菌作用是一致的。MEBO的藥效是與MEBT配合時產(chǎn)生的。

從表5-10-1～4中還可以看出，將每種細(xì)菌具有共同形態(tài)變異特點(diǎn)的歸為一組，這是較粗的分組，因?yàn)榧?xì)菌在MEBO的作用下，傳代的代數(shù)不同，以及同一代的細(xì)菌接觸MEBO的量的多少不同，在形態(tài)變異方面是有差別的。上述細(xì)菌發(fā)生形態(tài)結(jié)構(gòu)的變異現(xiàn)象，說明了細(xì)菌的代謝和生理等特性的改變與它所處的環(huán)境有密切關(guān)系。

多種細(xì)菌均能在沒有基因改變的情況下發(fā)生形態(tài)結(jié)構(gòu)等方面的變異。這種非遺傳性變異到目前為止除對誘導(dǎo)酶所引起的變異了解得比較深入外，其他變異現(xiàn)象的發(fā)生機(jī)制尚不十分清楚。但有充分證據(jù)說明分裂是受復(fù)制的控制。從上面現(xiàn)象也說明，細(xì)胞分裂對MEBO藥物非致死因子作用的敏感性，比蛋白質(zhì)、DNA、RNA合成和膜的形成更敏感，導(dǎo)致形成長桿菌和多核絲狀細(xì)胞。這種非遺傳性變異在適宜條件下經(jīng)過一段時間可以恢復(fù)。但上述桿菌在MEBO的作用下連續(xù)傳代，最后形成比原代菌小的桿菌或近似圓球形的細(xì)菌，多數(shù)細(xì)菌菌體可見著色深的顆粒。說明細(xì)菌在MEBO環(huán)境中最終導(dǎo)致了細(xì)菌的代謝合成速度減慢，影響了細(xì)菌生長繁殖速度。又如金黃色葡萄球菌血漿凝固酶產(chǎn)生明顯減弱，這些都能影響細(xì)菌的毒性作用。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步說明了MEBO比含25%MEBO和含50%MEBO的抗菌作用都強(qiáng)。至于上述細(xì)菌變異現(xiàn)象的產(chǎn)生機(jī)制尚須深入探討研究。

(曲云英等)