※ 組織器官的原位再生復(fù)制研究報(bào)告
  1. 摘要
  2. 前言
  3. 概念
  4. 原位組織器官再生復(fù)制的技術(shù)流程
  5. 組織器官體外模型的建立及生命再生物質(zhì)的組成
  6. 組織器官原位再生復(fù)制的臨床實(shí)施
  7. 皮膚器官原位再生復(fù)制的組織、細(xì)胞學(xué)跟蹤
  8. 多種有關(guān)組織器官原位和體外復(fù)制的結(jié)果
  9. 研究結(jié)論

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四、組織器官體外模型的建立及生命再生物質(zhì)的組成

組織器官體外模型的建立是從獲取原位組織細(xì)胞開(kāi)始,用美寶生命再生物質(zhì)與MEM培養(yǎng)液培養(yǎng)組織細(xì)胞,使其增殖分化,形成原位組織或組織器官,從而建立了體外的組織器官模型。而后再以此模型,精確尋找各組織器官的專(zhuān)項(xiàng)生命物質(zhì),最后將所找到的生命物質(zhì)與美寶生命物質(zhì)一起組成組織器官的生命再生物質(zhì),以各種適當(dāng)?shù)膭┬陀糜谠坏慕M織器官,使其原位再生復(fù)制。

1、組織潛能再生細(xì)胞的激活和增殖分化

原位復(fù)制組織器官的生命基礎(chǔ)是原位器官組織中的潛能再生細(xì)胞,而潛能再生細(xì)胞的來(lái)源是原位的組織細(xì)胞,所以首先必須認(rèn)識(shí)組織再生潛能細(xì)胞的特性和變化規(guī)律,才能理解組織器官再生復(fù)制的機(jī)理和程序。經(jīng)過(guò)研究,我們已經(jīng)掌握了這一細(xì)胞的增殖再生特性,即,原位的組織細(xì)胞在被激活后,由靜止?fàn)顟B(tài)變?yōu)榉至褷顟B(tài),而后在生命再生物質(zhì)的作用下,轉(zhuǎn)為增殖和分化,在大量的增殖和分化后,這些細(xì)胞則根據(jù)自身的遺傳特性,自動(dòng)連接形成新組織,并向成熟的組織器官形態(tài)發(fā)展,最終形成原位新的組織器官。詳看細(xì)胞變化的圖片介紹(圖4.1-4.5)。(關(guān)于潛能再生細(xì)胞的研究,將在另一文章中介紹)。

第一步:從體外培養(yǎng)的組織塊中分離組織細(xì)胞
第二步:培養(yǎng)由組織中分離的組織細(xì)胞
第三步:潛能再生細(xì)胞(PRCs)開(kāi)始再生
第四步:潛能再生細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)增開(kāi)始形成組織
組織細(xì)胞中的潛能再生細(xì)胞在適宜的生理環(huán)境和充足的生命再生物質(zhì)培養(yǎng)下開(kāi)始擴(kuò)增,分化和再生
細(xì)胞連接開(kāi)始形成組織細(xì)胞,成為多種功能和形態(tài)的細(xì)胞,其中新產(chǎn)生的潛能再生細(xì)胞也參與組織形成
第五步:潛能再生細(xì)胞復(fù)制成新的組織器官
這是由潛能細(xì)胞再生出的新器官。在它周?chē)姓谠偕慕M織。

2、以小鼠小腸黏膜絨毛組織器官體外復(fù)制為例,介紹體外組織器官模型的建立;

取17天胚胎鼠小腸的近段,分別切成小塊,貼附在培養(yǎng)器皿的底部,加MEM培養(yǎng)液和美寶生命物質(zhì),共同培養(yǎng),首先使絨毛組織細(xì)胞從原位小腸組織塊上游離到培養(yǎng)液中,而后將游離出的組織細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng),促使組織細(xì)胞增殖分化;繼續(xù)培養(yǎng),增殖分化的細(xì)胞則自行連接,重新形成原位的絨毛組織器官。實(shí)現(xiàn)了體外組織器官模型的建立。(詳見(jiàn)絨毛組織器官?gòu)?fù)制的全過(guò)程圖片介紹圖2.1~2.7)。

2.1 懷孕母鼠

2.2 17天的胚胎
2.3 從胚胎中取出的成體近端小腸

2.4 把粘膜切成小塊
2.5 在六孔細(xì)胞培養(yǎng)板中貼壁培養(yǎng)
2.6 組織塊間的距離是1厘米

小腸的培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)組(加GIC)
 
對(duì)照組(不加GIC)
 
腸壁組織植塊貼壁的鏡下表現(xiàn)
     
實(shí)驗(yàn)組(加GIC)
 
對(duì)照組(不加GIC)
 
組織存活,一些細(xì)胞開(kāi)始從培養(yǎng)基中的組織中游離和遷移出來(lái)
 
組織死亡,從組織中遷移出的少數(shù)細(xì)胞也死亡了
 
在實(shí)驗(yàn)組中單細(xì)胞干細(xì)胞化增殖克隆復(fù)制
 
 

由相互聯(lián)接的擴(kuò)增細(xì)胞形成基礎(chǔ)組織(縱切面)
形成最基礎(chǔ)組織
基礎(chǔ)組織進(jìn)一步擴(kuò)大形成有形腸粘膜組織

較完整的腸粘膜復(fù)制完成(縱平面圖像)

3、生命再生物質(zhì)的組成

在新的組織器官體外模型建立后,繼續(xù)在體外用原有的培養(yǎng)液和美寶生命再生物質(zhì)培養(yǎng)的同時(shí),盡速以新形成的組織器官為模型,篩選特異的生命物質(zhì),凡能促進(jìn)增殖細(xì)胞形成絨毛組織器官的物質(zhì)和凡是能維持和延長(zhǎng)絨毛組織器官模型生命的物質(zhì),均被選做絨毛組織器官的生命物質(zhì),與美寶生命物質(zhì)一起構(gòu)成腸絨毛組織器官生命再生物質(zhì)。而后將這些生命再生物質(zhì)以相適的劑型作用于肌體原位器官,使組織器官原位再生。(詳見(jiàn)生命再生物質(zhì)的小腸原位再生實(shí)驗(yàn)介紹圖4.21~4.29)

本研究中再生的小腸粘膜與《科學(xué)》雜志上公布的小腸粘膜在形態(tài)學(xué)上的比較

本研究中再生的小腸粘膜和人體中的小腸粘膜在形態(tài)學(xué)上的比較

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